[FeFe]-氢化酶的活性位点辅因子由一个立方烷[4Fe-4S]-簇和一个独特的[2Fe-2S]-团簇组成，含有不寻常的CO-和CN^-配体。[2Fe-2S]-簇的生物合成需要三种专用的成熟酶HydG、HydE和HydF。HydG和HydE都参与了[2Fe-2S]-前体的合成，但仍缺乏连接两个铁原子的氮杂二硫代硫酸盐（adt）部分。然后，该[2Fe-2S]-前体最终在支架蛋白HydF内形成，该支架蛋白结合并将[2Fe-2S]前体转移到氢化酶。然而，在与HydF中的确切结合模式仍然难以捉摸。

图片来源：J. Am. Chem. Soc.

有鉴于此，Ruhr University Bochum的Thomas Happe通过定点突变改变高度保守的蛋白质口袋的大小和电荷，确定了[2Fe-2S]-前体的结合位置。

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此外，这项研究还鉴定了两个丝氨酸残基对结合和组装[2Fe-2S]-前体是必不可少的。总之，在这项工作中，通过结合定点突变和分子对接模拟提供了一个关于[2Fe-2S]-簇如何与HydF结合的新模型，并证明了在adt部分的生物组装过程中一个高度保守的天冬氨酸残基的重要作用。

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原文标题：A Conserved Binding Pocket in HydF is Essential for Biological Assembly and Coordination of the Diiron Site of [FeFe]-Hydrogenases

原文作者：Rieke Haas, Oliver Lampret, Shanika Yadav, Ulf-Peter Apfel, and Thomas Happe*

https://doi.org/10.1021/jacs.4c01635